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液相色譜柱在使用過(guò)程中應(yīng)當(dāng)著重注意的問(wèn)題

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   液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。色譜柱在色譜儀分析系統(tǒng)中起著分離作用,是色譜分析的核心部件。正確使用和維護(hù)色譜柱尤為重要,使用不當(dāng)就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚損壞。以下從七個(gè)方面簡(jiǎn)單介紹液相色譜柱在使用過(guò)程中應(yīng)當(dāng)著重注意的問(wèn)題。
  1、避免壓力和溫度的急劇變化
  溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,以保持色譜柱內(nèi)填料的穩(wěn)定性。
  2、避免直接改變?nèi)軇┑慕M成
  在需要改變檢測(cè)樣品溶液組成是,應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳?。且在使用次洗脫能力?qiáng)的洗脫液沖洗色譜柱時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ML。
  3、避免色譜柱反沖
  一般來(lái)說(shuō)色譜柱不能反沖,只有色譜柱使用說(shuō)明書(shū)上標(biāo)明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則,反沖色譜柱的影響是迅速降低柱效。
  4、避免流動(dòng)相使用不當(dāng)而破壞固定相
  選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是PH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一段預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠"飽和",避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
  5、禁止樣品未經(jīng)處理直接進(jìn)入色譜柱
  避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
  6、禁止將緩沖溶液長(zhǎng)時(shí)間存放在色譜柱內(nèi)
  保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿(mǎn)乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間。
  7禁止色譜柱未經(jīng)處理直接封存
  色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理,例如ODS柱宜用甲醇沖洗基線(xiàn)平衡;當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí),使用完后應(yīng)用無(wú)鹽流動(dòng)相沖洗;含鹵族元素(氟、氯、溴)的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道,不宜長(zhǎng)期與之接觸;裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4-5天開(kāi)機(jī)沖洗15分鐘。

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